風溼性心臟病屬於鏈球菌感染後誘發的自身免疫性疾病，常可累及心臟和血管等多個器官。因此在懷疑存在風溼性心臟病時，需要進行一系列實驗室檢查、影像學檢查以及特殊檢查等明確診斷。
實驗室檢查
血常規
可以觀察白血球總數是否增高，若出現白血球增高，則提示可能存在鏈球菌感染的情況，可能與風溼性心臟病有關。
2. C反應蛋白(CRP)(CRP)檢測：CRP升高可見於心肌梗塞、心臟衰竭等情況，也可見於類風溼關節炎、系統紅斑狼瘡、僵直性脊椎炎等疾病活動期，而風溼熱活動期也可導致其明顯升高，故可用於輔助判斷風溼性心臟病。
抗核抗體譜檢測
包括抗核膜抗體、抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、Sm抗體等，其中抗核抗體為基本專案，其他抗體陽性有助於鑑別結締組織病合併風溼性心臟病。
心肌傷害標志物測定
如肌鈣蛋白I (cTnI)，當發生急性心肌梗塞或慢性心臟衰竭急性失代償時，可表現為cTnI顯著增高，還可用於指導溶栓治療的選擇。
5. 血清補體C3、C4水平測定：補體異常通常提示身體存在發炎，而風溼熱是一種由鏈球菌感染所致的全身小血管炎，因此該指標改變對確診風溼性心臟病具有一定意義。
抗鏈"O"試驗
即鏈球菌感染相關測試，正常參考值< 20 U/mL，如果＞50U/mL則高度懷疑近期有A族β型溶血性鏈球菌感染，常見於急性的咽峽炎或者扁桃腺化膿性感染，對於早期診斷風溼性心臟病也有一定價值。
影像學檢查
胸部X光檢查
主要目的是排除肺部病變，如肺炎、肺擴張不全、胸膜滲出液、氣道擴張、肺間質纖維化等，還可以顯示心影增大、右室增大、左房擴大、心包鈣化等徵象。
心臟超音波
心臟超音波無創且簡便，是臨床常用的一種評價風溼性心臟病患者心功能狀態的方法之一，能夠準確測量各瓣膜口面積、測出左右心室容量和壓力變化、估算每搏輸出量，並能確定有無心包膜積水、心內膜沾黏、贅生物附著等。
特殊檢查
風溼性心臟病往往伴隨不同程度的瓣膜關閉不全或狹窄，此時需透過心導管檢查明確是否存在動脈導管未閉、心房中隔缺損、室間隔缺損等情況，必要時可行介入封堵術或手術修補。
除上述情況外，懷疑患有風溼性心臟病的人群還需及時到醫院風溼免疫科就診，完善抗核抗體篩查、抗雙鏈DNA抗體篩查、抗人球蛋白試驗等檢查以明確診斷。
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